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詳細信息
【獸藥名稱】
通用名:羊棘球蚴(包蟲)EG95蛋白ELISA抗體檢測試劑盒
商品名:無
英文名:ELISA Kit for Detection of Goat and Sheep Antibody against EG95 Protein of Echinococcus (Hydatid)
漢語拼音:Yang Jiqiuyou (Baochong) EG95 Danbai ELISA Kangti Jiance Shijihe
【主要成分與含量】
(1) | 抗原包被板 | 96孔/板x2板/盒 |
(2) | 陰性對照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
(3) | 陽性對照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
(4) | 酶標二抗 | 0.2mL/管x2管/盒 |
(5) | 稀釋液 | 30mL/瓶x2瓶/盒 |
(6) | 10x濃縮洗滌液 | 30mL/瓶x1瓶/盒 |
(7) | TMB底物A液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(8) | TMB底物B液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(9) | 終止液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
(10) | 血清稀釋板 | 96孔/板x2板/盒 |
(11) | 封板膜 | 2張/盒 |
(12) | 說明書 | 1份/盒 |
【性狀】
試劑盒應(yīng)密封完好、無破損、無裂痕、無滲漏。抗原包被板、陽性對照血清、陰性對照血清、酶標二抗、稀釋液、10x濃縮洗滌液、TMB底物A液、TMB底物B液、終止液等組分齊全。
【作用與用途】
用于檢測綿羊、山羊血清中細粒棘球蚴(包蟲)主要保護性抗原EG95蛋白的抗體。
【用法與判定】
1 用法
1.1 樣品制備 取動物全血,待血液凝固后,4000r/min離心10分鐘,收集上清備用;也可采集血液,待凝固后自然析出血清,吸出血清備用。要求血清清亮,無溶血。
1.2 洗滌液配制 10x濃縮洗滌液恢復至室溫后充分搖勻,用去離子水作10倍稀釋備用。
1.3 樣品與對照品稀釋 在血清稀釋板上,將待檢血清和陰、陽性對照血清按1:50倍的體積稀釋(推薦稀釋方法:98uL樣品稀釋液中加2uL血清樣品)。
1.4 操作步驟
1.4.1 加樣 取抗原包被板,每孔加入50u稀釋液,再取稀釋好的待檢血清和對照血清各50uL加入相應(yīng)孔中,其中,陰性、陽性對照血清各2孔,輕輕振搖混勻孔中樣品(勿溢出)。
1.4.2 溫育 置37°C溫箱內(nèi)30分鐘。
1.4.3 洗滌棄去反應(yīng)液,每孔加入稀釋好的洗滌液200uL,室溫靜置浸泡1分鐘,用掉洗滌液,在吸水紙上拍干,重復3次:或者自動洗板機洗滌3次。
1.4.4 加酶標二抗 用稀釋液將酶標二抗進行1:100稀釋(現(xiàn)配現(xiàn)用),每孔加入稀釋好的酶標二抗100uL。
1.4.5 溫育 置37°C溫箱內(nèi)30分鐘。
1.4.6 洗滌 同1.4.3。
1.4.7 顯色 每孔加入100uL底物工作液(TMB底物A液與B液等體積混合好,現(xiàn)配現(xiàn)用),室溫避光顯色反應(yīng)10分鐘。
1.4.8 終止每孔加終止液50uL,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果
1.4.9 讀數(shù) 在酶標儀內(nèi)讀取各孔450nm波長吸光度。
2 判定
2.1 試驗成立條件陽性對照孔OD:值均>1.20,陰性對照孔ODsom值均<0. 20。
2.2 結(jié)果判定 待檢血清孔OD值<0.30,判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陰性;待檢血清孔OD:som值≥0.30,判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陽性。
【注意事項】
(1)除酶標二抗外,各種試劑都應(yīng)于使用前平衡至室溫后方可使用,有結(jié)晶析出的,務(wù)必37℃水浴加熱使其完全溶解;液體試劑用前混勻。為保證結(jié)果準確可靠,操作環(huán)境溫度應(yīng)控制在20土5℃。
(2)微量移液器應(yīng)進行定期校準,以避免誤差過大影響檢測結(jié)果。
(3)應(yīng)確保血清樣本的質(zhì)量,避免使用嚴重溶血樣品和脂狀樣品;避免清樣本反復凍融;血清樣本2~8℃儲存應(yīng)不超過5天,長期保存應(yīng)置-20℃以下:如血清樣本出現(xiàn)渾濁或絮狀物,應(yīng)離心后取上清進行檢測。
(4)防止試劑和樣本的相互污染;試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,避免不同批次的試劑盒混用。
(5)沒有用完的抗原包被板條應(yīng)與干燥劑一同放回密封袋中,于2~8℃保存。
(6)溫育時,反應(yīng)板不能看放,應(yīng)平鋪在37℃溫箱中,以免導致各反應(yīng)板受熱不均。
(7)TMB底物A液和B液不要暴露于強光,避免接觸氧化劑。
(8)終止液具有腐蝕作用,避免接觸眼睛和皮膚。
(9)嚴格按說明書操作,并控制好每一步的反應(yīng)時間和溫度。
(10)本試劑盒不能區(qū)分細粒棘球蚴自然感染與疫苗免疫接種產(chǎn)生的抗體:本試劑盒檢測多頭蚴感染的羊血清時,出現(xiàn)7.69%(1/13)陽性率,因此,不排除其與羊多頭蚴抗體發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性。
【規(guī)格】192孔/盒
【貯藏與有效期】2~8℃保存,有效期為9個月。
【批準文號】獸藥生字230248948
【生產(chǎn)企業(yè)】重慶澳龍生物制品有限公司
【地 址】重慶市榮昌區(qū)板橋工業(yè)園區(qū)四支路五號
【郵 編】402460
【技術(shù)服務(wù)】023-46763511
【銷售熱線】023-46761801
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